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Streptavidin PLA Particles,鏈霉親和素修飾PLA微球的描述

2025-10-12 [71]

鏈霉親和素修飾PLA微球是通過化學方法將鏈霉親和素蛋白共價結合到聚乳酸(PLA)微球表面形成的功能化顆粒,結合了PLA的生物相容性、可降解性以及鏈霉親和素對生物素的高特異性結合能力,在生物醫學領域具有重要應用價值。

一、特性

  1. 高特異性結合:鏈霉親和素對生物素具有較高的親和力(親和常數約10?1? M),可特異性捕獲生物素標記的分子(如抗體、核酸、蛋白質等),形成穩定復合物。

  2. 良好的懸浮性與分散性:PLA微球粒徑可控、表面可電荷調節,使微球在緩沖液中懸浮穩定,不易聚集。

  3. 生物穩定性強:鏈霉親和素即便在化學交聯或包埋后仍保留生物活性,且與生物素結合不易解離,確保功能穩定性。

  4. 功能擴展性強:微球表面殘余活性基團(如羧基、羥基)可進一步修飾熒光染料、抗體、酶等,拓展應用范圍。

  5. 高比表面積:提供大量結合位點,可高效負載生物素標記的分子,提高反應效率。

二、制備方法

  1. PLA微球制備

    • 乳液聚合法:將PLA溶于有機溶劑中,加入乳化劑形成油包水型乳液,通過揮發去除溶劑后固化得到PLA微球。

    • St?ber法:適用于制備二氧化硅-PLA復合微球,通過水解縮合反應在微球表面引入活性基團。

  2. 表面活化處理

    • 利用化學方法(如使用氧化劑、酸或堿等)對PLA微球表面進行處理,使其表面產生活性基團(如羥基、羧基等),以便后續與鏈霉親和素進行共價結合。

    • 常用的活化劑有戊二醛、碳二亞胺等。

  3. 共價結合鏈霉親和素

    • 將鏈霉親和素與活化后的PLA微球在適當的條件下(如一定的溫度、pH值和反應時間)進行反應,使鏈霉親和素通過共價鍵連接到微球表面。

    • 反應過程中需控制條件以確保結合效率和活性保留。

  4. 脫除未反應的鏈霉親和素

    • 反應結束后,通過洗滌、離心等方法去除未與PLA微球結合的鏈霉親和素,確保產品純度。

三、儲存注意事項

  1. 儲存條件

    • 一般需密封,在-20℃的環境中冷藏保存,切勿凍存,以保持其穩定性和活性。

    • 避免高溫環境,以防PLA微球融熔變形或粘結成團。

  2. 使用前處理

    • 在使用前需要用純水或所用緩沖溶液清洗2-3遍,以去除可能殘留的雜質和未結合的物質。

  3. 使用過程中注意事項

    • 應盡量避免長時間超聲破壞微球表面,因為超聲可能會導致微球結構的損壞或鏈霉親和素從微球表面脫落。

    • 注意避免混入多價陽離子和有機溶劑等可能影響微球性能的物質。

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